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| RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定 | |
| 引用本文： | 周琪,梁后杰,阎晓初,彭秋平,周进明,吴峰,钟大平,边志衡.RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定[J].第三军医大学学报,2007,29(8):691-694. |
| 作者姓名： | 周琪 梁后杰 阎晓初 彭秋平 周进明 吴峰 钟大平 边志衡 |
| 作者单位： | 1. 第三军医大学西南医院病理科,重庆,400038;第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038 2. 第三军医大学西南医院肿瘤科,重庆,400038 3. 第三军医大学西南医院病理科,重庆,400038 |
| 摘 要： | 目的 构建Neuropilins-2(NRP2)基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以NRP2为靶基因,以pGenSil-l质粒为载体,设计构件重组体,根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGenSil-l中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析.重组pGenSil-NRP2载体转染LOVO细胞48 h,收获细胞,采用Western blotting检测其NRP2蛋白表达.结果 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功.重组体pGenSil-NRP2转染LOVO细胞48 h后NRP2蛋白表达显著降低.结论 利用RNAi技术可成功构建抑制NRP2表达的小干扰RNA重组体. |
| 关 键 词： | RNA干扰 真核表达载体 |
| 文章编号： | 1000-5404（2007）08-0691-04 |
| 修稿时间： | 2006-09-21 |
Construction and effect of Neuropilins-2 eukaryotic expression vector for RNA interference |
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| ZHOU Qi,LIANG Hou-jie,YAN Xiao-chu,PENG Qiu-ping,ZHOU Jin-ming,WU Feng,ZHONG Da-ping,BIAN Zhi-heng.Construction and effect of Neuropilins-2 eukaryotic expression vector for RNA interference[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2007,29(8):691-694. | |
| Authors: | ZHOU Qi LIANG Hou-jie YAN Xiao-chu PENG Qiu-ping ZHOU Jin-ming WU Feng ZHONG Da-ping BIAN Zhi-heng |
| Institution: | 1. Institute of Pathology;2.Department of Phymatology, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | NRP2 |
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