K-ras反义核酸抑制肺腺癌细胞A549的生长

目的:探讨K-ras反义核酸抑制肺癌生长的机制。方法:应用Westernblotting检测K-ras基因在6例肺腺癌标本和A549细胞中的表达;构建K-ras基因的反义表达载体(命名为antisense-K-ras-pcDNA3.1),转染后,MTT法测细胞的生长曲线,AnnexinV检测细胞凋亡;Westernblotting检测cyclinA、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK4、P53、Rb和caspase-3的表达。结果:在A549细胞和6例肺腺癌标本中,A549细胞和4例标本中K-ras基因高表达;MTT结果显示从第4d开始,转染K-ras反义核酸的细胞生长明显受到抑制,而且细胞凋亡现象较明显;Westernblotting显示转染反义K-ras基因的细胞中cyclinA、cyclinD1、cyclinE、CDK2和CDK4的表达降低,而caspase-3、P53和Rb的表达升高。结论:K-ras基因反义核酸能够抑制细胞生长,可能与cyclinA、cyclinD1、cyclinE、CDK2和CDK4的表达降低和caspase-3、P53、Rb的表达升高有关。