| 含人过氧化物酶体增殖物激活受体δ基因高效真核表达载体的构建及其意义 |
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| 作者姓名： | 章涛 杨贵忠 袁野 万敬员 杨俊卿 蒋建新 周岐新 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学药理学教研室,重庆,400016;第三军医大学创伤烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 构建高效表达人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPARδ)的真核表达载体,为hPPARδ受体功能和基于hPPARδ受体靶点的药物筛选提供分子研究平台.方法 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),从HepG2细胞总RNA克隆hPPARδ全长基因,与经BamHI、SalI相同双酶切的pIRES2-EGFP载体连接,构建重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP,经酶切及基因测序鉴定重组质粒中hPPARδ基因的完整性和忠实性;荧光显微镜观察重组质粒转染的293细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和免疫细胞化学检测.结果 经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的293细胞中获得hPPAR6的高效表达.结论 成功构建phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒.
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| 关 键 词： | 过氧化物酶体增殖物激活受体δ 基因克隆 真核表达 逆转录-聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 0529-1356（2007）02-173 |
| 收稿时间： | 2006-09-05 |
| 修稿时间： | 2006-09-052006-11-20 |
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