重组人干扰素αdb质量肽图分析及二硫键定位

目的：液质联用绘制重组人干扰素αlb的质量肽图并鉴定二硫键位点。方法：LC-MS联用绘制重组人干扰素αlb的胰蛋白酶酶切质量肽图;对比特定肽段的实测相对分子质量与理论相对分子质量初步定位二硫键,对比烷基化及还原烷基化处理后特定肽段实测相对分子质量的变化确证二硫键位点。结果：重组人干扰素αlb的质谱测定相对分子质量为19382．50,与理论相对分子质量19382．18一致,其质量肽图中共发现16个匹配肽段,有3个理论酶切片段（单一氨基酸：Lys135、Lys165、Glu166）未发现,氨基酸覆盖率为98．2％。通过分析胰蛋白酶酶切质量肽图,发现主要存在2种二硫键连接方式：Cys29-Cys139、Cys86-Cys99,同时还存在少量其他二硫键连接方式,如：C1-C99。结论：质量肽图可作为一种对重组蛋白制品进行质量控制的手段,并可定位蛋白中的二硫键。