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甲钴胺对VZV病毒感染施万细胞中朊蛋白和TNF-α转换酶表达的影响
作者姓名:许纲  周朝生  唐维桢  张雨  徐刚  程超  许洁  王晓梅
作者单位:同济大学附属第十人民医院,上海市第十人民医院,带状疱疹神经痛诊疗中心,上海200072
基金项目:国家自然科学基金(81771209);
摘    要:目的:探究感染水痘-带状疱疹病毒(VZV)对人施万细胞(hSC)朊蛋白(PrPC)、肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)和肿瘤坏死因子-α受体1(TNFR1)表达的影响,及甲钴胺(MCbl)的调节作用。方法:将传代培养的hSC分为:空白对照组、VZV感染组、VZV感染加MCbl干预组、VZV感染PrPC基因(Prnp)siRNA转染细胞组、VZV感染Prnp-siRNA转染细胞加MCbl干预组。设计合成Prnp的siRNA序列转染hSC,构建PrPC表达下调的hSC模型。以感染复数为1.0的VZV分别感染后4组细胞3 d后,加药组分别加入250μg/ml的MCbl干预。感染7 d后采用CCK-8法评估细胞活力,real time RT-PCR检测Prnp mRNA表达,Western Blot分析PrPC糖基化的变化,免疫荧光双染检测TACE和TNFR1的表达,TACE试剂盒检测其酶活性的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中可溶性TNFR1(sTNFR1)的浓度。结果:与对照组比较,感...

关 键 词:水痘-带状疱疹病毒  细胞型朊蛋白  肿瘤坏死因子-α转换酶  肿瘤坏死因子-α受体1  甲钴胺  施万细胞
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