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p53基因沉默对HaCaT细胞MicroRNA表达谱的影响
引用本文:任金平,王平,洪为松,韩飞,黎钊,倪亚杰.p53基因沉默对HaCaT细胞MicroRNA表达谱的影响[J].中华皮肤科杂志,2013,46(4).
作者姓名:任金平  王平  洪为松  韩飞  黎钊  倪亚杰
作者单位:1. 浙江中医药大学附属杭州市第三人民医院皮肤科,杭州,310053
2. 杭州市第三人民医院皮肤科
3. 安徽医科大学杭州临床医学院
基金项目:浙江省自然科学基金,杭州市医学重点专科专病项目
摘    要:目的 研究p53基因沉默前后HaCaT细胞microRNA (miRNA)的差异表达谱并进行相关功能分析.方法 利用慢病毒介导的RNAi对培养的HaCaT细胞株进行p53基因沉默,通过Trizol法抽提细胞总RNA,PEG(聚乙二醇)方法分离miRNA,T4RNA连接酶荧光标记后进行miRNA芯片杂交,利用Genepix4000B图像分析软件和Genepix Pro 6.0软件进行数据分析,生物信息学方法检索出p53基因沉默前后HaCaT细胞差异表达的miRNA调控的靶基因,选取每个miRNA调控的前20个靶基因进行靶基因功能及KEGG分析.结果 p53基因沉默前后HaCaT细胞中发现53个差异表达的miRNA,其中41个表达上调,12个下调(差异>2倍).上调超过200倍的miRNA有:hsa-miR-141-3p、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-27a-3p、hsa-miR-130b-3p、hsa-miR-19a-3p;下调超过75%的miRNA有:hiv1-miR-TAR-3p、hsa-miR-630、hsa-miR-1246、hsa-miR-1275.靶基因预测和靶基因KEGG分析结果显示,部分靶基因与MAPK信号通路、代谢通路、肿瘤侵袭等有关.结论 hsa-miR-141-3p等9个miRNA及其调控的靶基因可能参与p53的分子调控.

关 键 词:基因  p53  角蛋白细胞  微RNAs  基因沉默  芯片分析技术

Effect of p53 gene silencing on microRNA expression profiles in HaCaT human keratinocytes
REN Jin-ping , WANG Ping , HONG Wei-song , HAN Fei , LI Zhao , NI Ya-jie.Effect of p53 gene silencing on microRNA expression profiles in HaCaT human keratinocytes[J].Chinese Journal of Dermatology,2013,46(4).
Authors:REN Jin-ping  WANG Ping  HONG Wei-song  HAN Fei  LI Zhao  NI Ya-jie
Abstract:
Keywords:Genes  p53  Keratinocytes  MicroRNAs  Gene silencing  Microchip analytical procedures
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