| 转铁蛋白受体介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV系统的构建及体外效应研究 |
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| 引用本文： | 曹利民,王骞,潘宇红,陈蓉芳,卢志贤,马志兰,祝建中,沈关心. 转铁蛋白受体介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV系统的构建及体外效应研究[J]. 南通医学院学报, 2003, 23(2): 127-129,132 |
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| 作者姓名： | 曹利民 王骞 潘宇红 陈蓉芳 卢志贤 马志兰 祝建中 沈关心 |
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| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院免疫学系
2. 江苏省无锡市第三人民医院,无锡214400 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( NO:39970 693) |
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| 摘 要： | 目的：构建肝癌靶向性HSV—tk／GCV基因转移系统，并研究其在体外对肝癌细胞的杀伤效应。方法：体外培养通过基因重组技术构建和表达抗转铁蛋白受体(TfR)人—鼠嵌合抗体的转染瘤细胞D2C5．6，诱导裸鼠(Balb／c，nu／nu)产生腹水并纯化；以蛋白质连接因子—水溶性碳二亚胺(EDC)介导TfR的抗体与多聚左旋赖氨酸的连接(Ab—PLL)，与pEBAF／tk按比例混匀，得到Ab—PLL—pETAF／tk基因转移系统；分别转染不同的细胞株进行体外效应研究：人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721，人肺癌细胞株549，观察给予不同浓度的更昔洛韦(GCV)随时间延长的细胞改变情况，用MTT法检测GCV对不同细胞的杀伤作用。结果：分析型酸性尿素凝胶电泳证实抗TfR的抗体与PLL成功连接；体外杀伤实验显示：经Ab—PLL—pETAF／tk基因转移系统处理的3种细胞对GCV表现出不同的敏感性。HepG2细胞(CD71 ，AFP )对GCV很敏感，低浓度的GCV(1mg／L)处理3d，即可使细胞生长抑制率达到74．8％，SMMC7721细胞(CD71 ，AFP )对GCV低度敏感，A549(CD71-，AFP-)对GCV不敏感。结论：TfR介导的肝癌靶向性HSV—tk／GCV基因转移系统构建成功；有可能用以肝癌细胞为靶细胞的基因治疗的研究。
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| 关 键 词： | 肝癌 基因治疗 tk基因 靶向性 抗CD71人—鼠嵌合抗体 转铁蛋白受体 体外效应 |
| 文章编号： | 1000-2057(2003)02-0127-03 |
The construction and in vitro biological effect of a hepatoma-specific tk gene delivery system mediated by receptor |
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| CAO Limin,WANG Qian,PAN Yuhong,et al. The construction and in vitro biological effect of a hepatoma-specific tk gene delivery system mediated by receptor[J]. ACTA Academiae Medicinae Nantong, 2003, 23(2): 127-129,132 |
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| Authors: | CAO Limin WANG Qian PAN Yuhong et al |
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| Affiliation: | CAO Limin,1WANG Qian,PAN Yuhong,et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatocellular Carcinoma Gene therapy HSV-tk Gene Targeting Anti-CD71 mouse/human chimeric antibodies |
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