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流感病毒M1单克隆抗体的制备及其生物学特征
引用本文:陈帅帅,丁建祖,尤金彪,沃恩康,王怡婷,曹毅,郭霞,杨新燕,张儒轩.流感病毒M1单克隆抗体的制备及其生物学特征[J].国际流行病学传染病学杂志,2015,42(1).
作者姓名:陈帅帅  丁建祖  尤金彪  沃恩康  王怡婷  曹毅  郭霞  杨新燕  张儒轩
作者单位:1. 浙江省医学科学院生物工程研究所,杭州,310013
2. 浙江省医学科学院寄生虫病研究所,杭州,310013
3. 浙江省中山医院检验科,杭州,310005
4. 浙江省中医院皮肤科,杭州,310006
5. 浙江省医学科学院药物研究所,杭州,310013
基金项目:国家自然科学基金,国家中医药管理局项目,浙江省科技计划
摘    要:目的 制备针对流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体(mAb),为研究流感病毒检测试剂盒提供实验材料.方法 以纯化的M1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选出分泌抗M1 mAb的杂交瘤细胞,注射小鼠腹腔获得M1 mAb,并用辣根过氧化物酶(HRP)标记M1 mAb.通过Western印迹法、ELISA、细胞感染免疫染色实验检测所获M1 mAb的作用和特性.结果 获得能稳定分泌抗流感病毒基质蛋白M1的杂交瘤细胞系,纯化腹水得到M1 mAb和HRP-M1 mAb.Western印迹法结果显示,M1 mAb和HRP-M1 mAb能与M1抗原及H1N1、H3N2亚型流感病毒的M1蛋白反应,是针对M1蛋白的mAb;利用ELISA方法研究M1 mAb和HRP-M1 mAb对M1抗原及流感病毒的检测作用,结果显示它们能检测H1N1和H3N2亚型的甲型流感病毒,而HRP-M1 mAb的检测能力比M1 mAb强;细胞免疫染色实验显示,M1 mAb能结合H1N1和H3N2亚型病毒感染的细胞.结论 针对M1蛋白的M1 mAb和HRP-M1 mAb已制备成功.它们能检测H1N1和H3N2亚型甲型流感病毒,有望应用于流感病毒诊断以及鉴别诊断试剂盒的研发.

关 键 词:流感病毒A型  M1蛋白  抗体  单克隆

Preparation and biological characteristics of the influenza virus matrix protein M1 monoclonal antibody
Abstract:
Keywords:Influenza A virus  M1 protein  Antibody  monoclonal
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