miR-20a调控P-gp对非小细胞肺癌细胞A549顺铂化疗敏感性的影响

目的 探讨miR-20a调控P-gp对非小细胞肺癌细胞A549顺铂（DDP）化疗敏感性的影响。方法 体外培养A549细胞并诱导产生A549/DDP细胞，RT-PCR方法检测miR-20a和P-gp mRNA表达情况。通过生物信息学网站预测miR-20a与P-gp是否有潜在的结合位点，通过荧光素酶报告基因实验进行验证。按Lipofectamine2000说明书方法分别将miR-NC和miR-20a mimic转染到A549/DDP细胞，检测不同浓度DDP对细胞增殖率的影响，确定半数抑制浓度，采用流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot方法检测细胞中P-gp、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达情况。结果 A549/DDP细胞中miR-20a表达水平降低，P-gp mRNA表达水平增加（P<0.05),P-gp是miR-20a的靶点。随着DDP浓度增加，细胞增殖率降低（P<0.05）；相同DDP浓度下，miR-20a mimic组细胞增殖率显著降低（P<0.05）。用DDP浓度为40.00μmol/L作为干预浓度进行后续检测，与miR-NC组相比，miR...