CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-κB活性的cAMP-PKA通路研究

目的：用cAMP激动剂forskolin和PKA抑制剂H-89,探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞（PIMs）核因子-κB（NF-κB）活性的cAMP-PKA信号通路机制。方法：分离纯化大鼠PIMs。用电泳迁移率改变分析（EMSA）法检测大鼠PIMs中NF-κB活性,用Westernblotting分析IκB-α蛋白水平。结果：正常对照组大鼠PIMs核内未检测到与特异性寡核苷酸探针相结合的NF-κB,LPS组细胞内NF-κB活性明显高于正常对照组（P0.05）。CCK+LPS组和Fsk+LPS组,细胞内NF-κB活性均低于LPS组（P<0.05）,IκB-α含量均高于LPS组（P<0.01）。LPS+CCK+H-89组NF-κB活性高于CCK+LPS组（P<0.01）,而IκB-α蛋白水平低于CCK+LPS组（P<0.01）。结论：cAMP-PKA信号通路的活化可抑制LPS诱导的大鼠PIMs细胞内NF-κB活性升高和IκB-α蛋白水平的降低,CCK-8的抗炎作用是通过激活cAMP-PKA信号通路进而抑制NF-κB活性来实现的。