| 免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究 |
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| 引用本文： | 何静云,刘星,张丽芳,李红.免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究[J].实验动物与比较医学,2006(2):126-131. |
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| 作者姓名： | 何静云 刘星 张丽芳 李红 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所 北京100021 |
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| 摘 要： | 目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0·5μg/107beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。
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| 关 键 词： | 免疫磁珠 泰泽氏病原体 血清学试验 |
| 修稿时间： | 2005/10/25 0:00:00 |
Isolation and Detection of Clostridium piliformis by Immunomagnetic Bead Assays |
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| HE Jing-yun,LIU Xing,ZHANG Li-fang,LI Hong.Isolation and Detection of Clostridium piliformis by Immunomagnetic Bead Assays[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2006(2):126-131. |
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| Authors: | HE Jing-yun LIU Xing ZHANG Li-fang LI Hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Immunomagnetic beads Clostridium piliformis Serodiagnostic reagent |
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