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抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-2单链抗体的构建、表达及功能研究
引用本文:戴克胜,祝怀平,阮长耿. 抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-2单链抗体的构建、表达及功能研究[J]. 中国免疫学杂志, 2003, 19(4): 243-247,252
作者姓名:戴克胜  祝怀平  阮长耿
作者单位:1. 江苏省核医学生物技术重点实验室
2. 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所,苏州,215006
摘    要:
目的:降低鼠源性抗体的免疫原性及分子量,为其进一步研究、应用奠定基础。方法:应用RT—PCR技术,克隆SZ-2重链、轻链可变基因。应用基因重组技术构建SZ-2单链抗体表达载体pET22-2scFv,导入大肠杆菌BL21(DE3)Plys,诱导表达。流式细胞术、ELISA、Western blot检测SZ-2 scFv与血小板结合能力,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究。结果:克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22—2scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主,表达量占菌体总蛋白的25%;纯化、复性后证明表达产物具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集。结论:成功表达了SZ—2单链抗体,该小分子抗体具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集。

关 键 词:抗血小板膜糖蛋白 单克隆抗体 SZ-2单链抗体 构建 表达 功能
文章编号:1000-484X(2003)04-0243-06

Production and expression of a single chain antibody against platelet in E. coli
DAI Ke Sheng,ZHU Huai Ping,RUAN Chang Geng. Production and expression of a single chain antibody against platelet in E. coli[J]. Chinese Journal of Immunology, 2003, 19(4): 243-247,252
Authors:DAI Ke Sheng  ZHU Huai Ping  RUAN Chang Geng
Affiliation:DAI Ke Sheng,ZHU Huai Ping,RUAN Chang Geng.The First Affiliated Hospital of Suzhou University,Jiangsu Institute of Hematology,Suzhou 215006,China
Abstract:
Keywords:Monoclonal antibody  Single chain Fv(scFv)  Platelet
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