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抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段基因的构建和表达
引用本文:林琳,鲁驰,朱明洁,胡晶莹,赵新泰. 抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段基因的构建和表达[J]. 中国免疫学杂志, 2003, 19(3): 173-176
作者姓名:林琳  鲁驰  朱明洁  胡晶莹  赵新泰
作者单位:上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室,上海,200032
基金项目:上海市卫生局青年科技基金资助 (项目编号 :99Y17)
摘    要:目的:通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人-鼠嵌合抗体2F7 Fab片段,方法:采用RT-PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体2F7杂交瘤中克隆该抗体的重,轻链可变区基因,将2F7单抗的重,轻链可变区基因装入带有人恒定区基因的表达载体pSW1-Fab中,构建得到pSW1-2F7 Fab,转化受体菌E.coil XL1-Blue,IPTG诱导表达,经Western blot和ELISA鉴定表达蛋白的活性。结果:从抗人小细胞肺癌单克隆抗体2F7杂交瘤中克隆获得了抗体重、轻链可变区基因,测序证实2F7单抗的重链(VH)可变区基因全长362bp,编码120个氨基酸,轻链(VL)可变区基因全长319bp,编码105个氨基酸,构建的2F7人-鼠嵌合Fab表达载体诱导后获得了目的蛋白的表达,主要分泌在菌液的上清中,表达量较高且稳定,具有与NCI-H128细胞特异性结合的活性。结论:构建和表达了抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段,表达产物具有与抗原结合的特异性,为进一步研究和应用打下了基础。

关 键 词:抗人小细胞肺癌单抗 人-鼠嵌合抗体 Fab片段 基因工程
文章编号:1000-484X(2003)03-0173-04

Construction and expression of a recombinant human-mouse chimeric Fab fragment of mAb 2F7
LIN Lin,LU Chi,ZHU Ming Jie et al Laboratory of Cellular and Molecular Immunology,Shanghai Cancer Institute,Shanghai ,China. Construction and expression of a recombinant human-mouse chimeric Fab fragment of mAb 2F7[J]. Chinese Journal of Immunology, 2003, 19(3): 173-176
Authors:LIN Lin  LU Chi  ZHU Ming Jie et al Laboratory of Cellular  Molecular Immunology  Shanghai Cancer Institute  Shanghai   China
Affiliation:LIN Lin,LU Chi,ZHU Ming Jie et al Laboratory of Cellular and Molecular Immunology,Shanghai Cancer Institute,Shanghai 200032,China
Abstract:
Keywords:Anti human small lung cancer mAb  Human mouse chimeric antibody  Fab fragment  Engineering antibody
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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