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I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生
引用本文:钱济先,张柏根,李桂云,张岚,邓廉夫,朱雅萍.I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生[J].第四军医大学学报,2001,22(19):1739-1743.
作者姓名:钱济先  张柏根  李桂云  张岚  邓廉夫  朱雅萍
作者单位:1. 第四军医大学唐都医院全军骨科中心
2. 上海第二医科大学仁济医院血管外科
3. 第四军医大学西京医院妇产科
4. 上海市伤骨科研究所
基金项目:上海市博士后科学基金资助 ( 98BSH14 2 0 )
摘    要:目的 观察 型内皮素受体 (ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用 .方法  1细胞培养 :取家兔主动脉中膜消化后培养传代 ,经抗 α- actin鉴定后使用第 4~ 6代传代细胞 ;2人工合成ODN:经 Genbank检索筛选 ,合成含 18bp ETA- ODN片段 ,再对 5 端硫代修饰以增加稳定性 ,同时行地高辛标记以检测反义片段的细胞膜穿透性 ;3 MTT分光光度法检测 ETA-ODN对 VSMC增殖的抑制作用 ;4运用放射受体结合分析法 (1 2 5I- ET- 1)了解 ODN对 ETA蛋白表达的抑制作用 ,以探讨其反义作用 ;5兔颈动脉空气干燥模型在体研究 ODN对血管内膜增生的抑制作用 :应用 F- 12 7凝胶载体携带 ETA-ODN(3.0μmol· L- 1 )导入血管周围 ,术后不同时间观察增生内膜相对厚度 .结果  ODN于培养后 12 h进入细胞内 ,并逐渐增加 ;15 μmol· L- 1 ETA- ODN对 VSMC增殖具有抑制作用 ,2 4h后即有显著作用 ;ETA- ODN对 ETA表达亦有明显的抑制作用 ,表现为 CPM于 2 4h逐渐减少 ;ETA- ODN导入后 ,血管增生内膜相对厚度减少 .结论  ETA- ODN以浓度和时间依赖方式抑制 ETA蛋白表达以及 VSMC的增殖 ;反义寡核苷酸是通过反义机制实现对 ETA蛋白和 VSMC增殖的抑制作用

关 键 词:I型内皮素  反义寡核苷酸  血管平滑肌细胞  VSMC增殖  内膜增生  血管疾病
文章编号:1000-2790(2001)19-1739-05
修稿时间:2001年1月5日

Antisense endothelin-1 receptor oligonucleotide inhibit vascular smooth muscle cell proliferation and intimal hyperplasia
QIAN Ji Xian ,ZHANG Bai Gen ,LI Gui Yun ,ZHANG Lan ,DENG Lian Fu ,ZHU Ya Ping Center of Orthopedics Surgery of Chinese PLA,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an ,China.Antisense endothelin-1 receptor oligonucleotide inhibit vascular smooth muscle cell proliferation and intimal hyperplasia[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2001,22(19):1739-1743.
Authors:QIAN Ji Xian  ZHANG Bai Gen  LI Gui Yun  ZHANG Lan  DENG Lian Fu  ZHU Ya Ping Center of Orthopedics Surgery of Chinese PLA  Tangdu Hospital  Fourth Military Medical University  Xi'an  China
Institution:QIAN Ji Xian 1,ZHANG Bai Gen 2,LI Gui Yun 3,ZHANG Lan 2,DENG Lian Fu 4,ZHU Ya Ping 4 1Center of Orthopedics Surgery of Chinese PLA,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710038,China,2Department of Vascu
Abstract:
Keywords:endothelin  oligonucleotides  antisense  vascular smooth muscle cell
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