朊蛋白调节Aβ介导的细胞凋亡及作用机制初步探讨

目的在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）细胞模型中验证PrPc朊蛋白（cellular prion protein，PrPc）是否影响神经细胞凋亡；在AD的细胞模型中探索PrPc是否影响β-分泌酶（β-site APP cleaving enzyme1，BACE1）及在AD发病中重要激酶-糖原合成酶激酶-3（glycogen synthase kinase 3 beta，GSK3β）。方法在稳定转染突变的淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APPswe）cDNA的小鼠脑神经瘤细胞（neuro-2a，N2a）中过表达pCDNA3．1-Prnp，通过4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（4′，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）标记细胞核DNA。另一方面通过蛋白免疫印迹方法（westernblot）检测BACE1、GSK3β表达水平。结果稳定过表达APPswe组与pCDNA3．1-Prnp＋APPswe组较正常对照组凋亡细胞增加，而pCDNA3．1-Prnp＋APPswe组细胞核碎裂更明显。而三组之间BACE1的表达水平差异无统计学意义，APPswe组与pCDNA3．1-Prnp＋APPswe两组GSK3β表达量较正常组增加，差异有统计学意义，而两组之间差异无统计学意义。结论PrPc在AD发病中可能介导Aβ所致的神经细胞凋亡。