骨桥蛋白靶向磁性纳米探针对动脉斑块的分子成像

目的 通过构建新型骨桥蛋白（OPN）靶向的四氧化三铁（Fe3O4）纳米颗粒,实现对动脉粥样硬化斑块中平滑肌增殖的荧光成像。方法 通过?COOH和?NH2之间的脱水缩合反应将OPN抗体偶联至DMSA修饰的Fe3O4纳米颗粒表面,进而将荧光染料NHS-Cy5.5连接获得纳米成像探针。通过噻唑蓝（MTT）和TUNEL方法检测探针对巨噬细胞的毒性。动脉粥样硬化动物模型通过高脂喂养ApoE?/?小鼠20周构建成功,继而将探针（5mg Fe/kg）经小鼠尾静脉注射,24h后用小动物活体成像仪系统进行光学三维成像,离体血管的冰冻切片做Cy5.5的激光共聚焦检测。结果 MTT结果显示,加不同浓度探针孵育：0,5,10,15,20,25,30mg/L相较于对照组来说,细胞活性并未表现出差异[A490nm：（1.10±0.03）,（1.05±0.03）,（1.03±0.02）,（0.96±0.02）,（0.96±0.03）,（0.93±0.03） vs （1.11±0.05）,P＞0.05];TUNEL结果显示,加不同浓度的探针孵育：0,10,20,25,30mg/L与对照组比较来说,细胞凋亡率差异无统计学意义[（21.2±1.5）%,（21.8±1.1）%,（21.5±1.2）%,（22.3±1.2）% vs （20.5±1.0）%,P＞0.05],证实探针在我们所运用浓度范围内对细胞几乎是无毒性的。探针经尾静脉注射到动脉粥样硬化模型小鼠体内后,24h光学成像可见颈部有明显的信号,且组织切片的激光共聚焦结果显示,探针主要集中在斑块内,HE染色结果进一步显示斑块的性质。结论 本实验所构建的探针在所使用浓度范围内基本无任何明显毒性,且对动物颈部动脉粥样硬化斑块有较好的识别效果。