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抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定
引用本文:艾洪武,郭军庆,游上游.抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定[J].中国免疫学杂志,2006,22(4):302-306.
作者姓名:艾洪武  郭军庆  游上游
作者单位:武汉市儿童医院检验部,武汉,430016
摘    要:目的:获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体(scFv)。方法:将AIF4c9scFv基因亚克隆于原核表达载体pPOW3,构建重组表达质粒pPOW4c9,电转化大肠杆菌DH5α,以温度诱导重组抗AIFscFv表达,经镍螯合层析柱纯化后,用ELISA和Westernblot检测表达蛋白与AIF的结合特性。结果:抗AIFscFv抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和力常数KD为3.18×10-8mol/L;纯化后的可溶性AIFscFv含量约为1.6mg/L。重组蛋白能特异识别AIF,并且具有良好的抗体生物学活性。结论:在大肠杆菌中表达并纯化了特异性可溶性抗AIFscFv抗体。

关 键 词:单链抗体  酸性同功铁蛋白  可溶性表达
文章编号:1000-484X(2006)04-0302-05
收稿时间:2005-02-29
修稿时间:2005-02-292005-08-29

Expression and identification of soluble single chain Fv antibody to acidic isoferritin in E.coli
AI Hong-Wu,GUO Jun-Qing,YOU Shang-You.Expression and identification of soluble single chain Fv antibody to acidic isoferritin in E.coli[J].Chinese Journal of Immunology,2006,22(4):302-306.
Authors:AI Hong-Wu  GUO Jun-Qing  YOU Shang-You
Abstract:
Keywords:Single chain antibody  Acidic isoferritin  Expression
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