抗Fas抗体诱导人肾间质成纤维细胞凋亡

目的检测人肾间质成纤维细胞(hRIFs)Fas表达并以抗Fas抗体诱导hRIFs凋亡。方法分离人肾肾乳头组织培养hRIFs，以细胞形态、免疫细胞化学染色和右旋缬氨酸选择性培养基培养作细胞鉴定。采用RT-PCR、免疫细胞化学染色检测正常hRIFsFas表达；不同γ干扰素浓度(γ-IFN，500U/ml、1000U/ml、l500U/ml和2000U/ml)与hRIFs孵育48h后，采用Northern杂交、Western印迹和流式细胞术检测Fas表达。经γ-IFN预处理(500U/ml，48h)的hRIFs，加人抗Fas抗体(IgM，O.5mg/m1)作用12h，以形态学、DNA电泳和流式细胞术观察细胞凋亡。结果培养细胞呈梭形，波形蛋白(+)，上皮细胞膜抗原(-)，选择性培养基内逐渐死亡。正常hRIFs有FasmRNA和蛋白表达，γ-IFN可明显上调其表达水平，直接免疫荧光流式细胞术测定未加γ-IFN的hRIFs中Fas表达阳性细胞占5.91％，上述浓度的γ-IFN作用后依次为59.44％、69.39％、70.06％和7547％，呈剂量依赖性增强。抗Fas抗体可引起高表达Fas的hRIFs核固缩、核断裂，DNA电泳呈现梯形结构，流式细胞术呈现亚二倍体凋亡细胞峰，对照组凋亡细胞百分数为7.99％，上述浓度抗Fas抗体作用后依次为24.35％、27.89％、29.38％和31.21％。结论Fas表达于hRIFs且可被γ-IFN显著上调，抗Fas抗体能够诱导高表达Fas的hRIFs凋亡。

Anti-Fas antibody induces apoptosis of cultured human renal interstitial fibroblasts