| sFv及重组人TNF-α融合基因表达载体的构建及瞬时表达 |
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| 引用本文： | 张建华,马保安,张惠中.sFv及重组人TNF-α融合基因表达载体的构建及瞬时表达[J].中华肿瘤防治杂志,2002,9(2):131-134. |
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| 作者姓名： | 张建华 马保安 张惠中 |
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| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所,陕西,西安,710038 |
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| 摘 要： | 目的 :构建pEGFP sFv rhTNF α表达载体 ,观察其在成骨肉瘤细胞 990 1中的瞬时表达。方法 :应用PCR方法对各目的基因进行扩增并经测序载体pGEM T Easy测序后 ,以逆转录病毒载体pLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因sFv rhTNF α ,并将其亚克隆至pEGFP N3 的EcoRI和BamHI位点间 ,成功构建表达载体pEGFP sFv rhTNF α ,并在该载体转染人成骨肉瘤细胞 990 1后观察融合蛋白表达情况。结果 :酶切鉴定证实sFv rhTNF α融合基因片段已克隆到pEGFP N3 的EcoRI和BamHI位点间 ,并在转染人成骨肉瘤细胞 990 1中观察到sFv rhTNF α融合基因及绿色荧光蛋白的表达。结论 :pEGFP sFv rhTNF α表达载体便于观察转染细胞中sFv rhTNF α融合蛋白的表达情况及蛋白定位 ,为单链抗体基因联合细胞因子基因疗法提供有利条件。
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| 关 键 词： | 单链抗体基因 肿瘤坏死因子-α 融合基因 表达 |
| 文章编号： | 1009-4571(2002)02-0131-04 |
| 修稿时间： | 2001年7月16日 |
Construction of pEGFP-sFv-rhTNF-α Expressing Vectors and Detection of Transient Expression |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sFv gene tumor necrosis factor alpha fusion gene expression |
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