包载人基质金属蛋白酶组织抑制因子1重组腺病毒微球的制备及其表征

背景:高分子载药微球可控释药物,易于实现靶向给药,是近年发展快速的的新剂型。目的:制备携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子1的重组腺病毒微球,并进行表征分析。方法:采用可降解的生物材料聚乳酸-聚乙烯醇包被携带人基质金属蛋白酶组织抑制因子1基因的重组腺病毒制成微球,体外检测其形态大小、包封率、载病毒率及释放规律。重组腺病毒微球感染人肝癌细胞株HepG2,检测感染效率,明胶酶谱分析测定微球对HepG2分泌TIMP-1的影响,Western blot检测人基质金属蛋白酶组织抑制因子1蛋白的表达,MTT实验检测细胞增殖率,体外侵袭小室实验检测细胞侵袭力。结果与结论:构建的包载人基质金属蛋白酶组织抑制因子1重组腺病毒的PELA微球直径约1.965μm,包封率为60.0%,载病毒率为10.5×108/mg,在120h内释放病毒量接近60%,总释放时间长于240h。腺病毒微球感染HepG2细胞,当微球>10mg时,感染效率可达90%以上。微球感染HepG2细胞后经Western blot检测可见人基质金属蛋白酶组织抑制因子1蛋白的表达。MTT实验及体外侵袭实验结果均提示重组腺病毒微球对HepG2细胞的体外增殖和侵袭有抑制作用,腺病毒微球组细胞增殖率较低(P<0.05),腺病毒微球感染的HepG2细胞体外侵袭力明显降低(P<0.01)。结果证实,制备的人基质金属蛋白酶组织抑制因子1重组腺病毒微球,高效缓释,可明显抑制肝癌HepG2细胞体外增殖和侵袭。

Preparation and characterization of microspheres encapusulating recombinant adenovirus with human tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1 gene

BACKGROUND:Polymer vehicle microsphere is a new form of medicine developed rapidly in recent years,which can control drug release,prolong the biological half-life of drugs,lessen side effects,and achieve targeted delivery. OBJECTIVE:To construct the polymer microsphere encapusulating recombinant adenovirus with human tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1(TIMP-1) gene,and to discuss its characterization. METHODS:The microsphere was constructed by biodegradable poly-DL-lactide-poly(PELA) encapsulati...