| 逆转录病毒方法建立小鼠诱导性多能干细胞的实验研究 |
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| 引用本文： | 单威,余勤,王标,刘丽珍,刘森泉,付珊,刘伟,周丽萍. 逆转录病毒方法建立小鼠诱导性多能干细胞的实验研究[J]. 浙江中医药大学学报, 2013, 37(2): 111-115 |
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| 作者姓名： | 单威 余勤 王标 刘丽珍 刘森泉 付珊 刘伟 周丽萍 |
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| 作者单位： | 浙江中医药大学生物工程学院;浙江大学医学院附属第一医院 |
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| 基金项目： | 浙江省科技计划项目(2009C14011);国家自然科学基金(81270566)~~ |
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| 摘 要： | [目的]采用逆转录病毒法转染P2代ICR的小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF),建立小鼠诱导性多能干细胞(inducedpluripotent stem cell,iPS cell,iPS细胞)。[方法]本实验采用293T细胞进行逆转录病毒包装,将分别携带来源于人的Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4转录因子的4种逆转录病毒液共转染ICR小鼠的MEF,并在转染过程中添加维生素C、丙戊酸钠来提高小鼠iPS细胞的诱导效率,通过碱性磷酸酶染色、RT-PCR方法检测建立的细胞株。[结果]转染的MEF在1周左右时间出现明显克隆,克隆传代的细胞经碱性磷酸酶染色呈紫红色,RT-PCR检测结果显示细胞株中的Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog 5种多能性相关的基因都得到明显表达。[结论]转染的MEF在1周左右时间出现明显克隆,小鼠iPS细胞的一些表面标志如碱性磷酸酶得到表达,Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog 5种多能性相关基因也都得到明显表达,表明已经建立小鼠iPS细胞。
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| 关 键 词： | iPS细胞 MEF 逆转录病毒 |
Research of Mouse Induced Pluripotent Stem Cell Created by Retrovirus Approach |
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| Affiliation: | Shan Wei,Yu Qin1,Wang Biao1,et al 1.Institute of Biological Engineering,Zhejiang Chinese Medicine University,Hangzhou(310053),China;2 The First Affiliate Hospital,Medical School of Zhejiang University |
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