| 5-氮杂-2’-脱氧胞苷抑制肾癌细胞增殖及逆转γ-catenin基因甲基化作用 |
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| 作者姓名： | 陶美满 孙 浩 马克均 张顺兴 尤海燕 |
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| 作者单位： | 陶美满,孙浩,马克均,张顺兴,TAO Mei-man,SUN Hao,MA Ke-jun,ZHANG Shun-xing(江苏大学附属医院泌尿外科,江苏,镇江,212001);尤海燕,YOU Hai-yan(江苏大学附属医院中心实验室,江苏,镇江,212001) |
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| 基金项目： | 江苏大学临床医学科技发展基金 |
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| 摘 要： | 目的:研究甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肾癌OS-RC-2细胞生长的抑制作用及对γ-catenin基因甲基化状态的影响,初步探讨肾癌发病机制及临床治疗的可行性.方法:不同浓度5-Aza-CdR处理肾癌细胞OS-RC-2后,采用倒置显微镜观察5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株前后细胞形态学变化;四唑蓝(MTT)比色观察细胞经药物处理前后的生长活性:流式细胞仪检测5-Aza-CdR对OS-RC-2肾癌细胞株凋亡的影响;Western blot检测5-Aza-CdR处理OS-RC-2肾癌细胞株后γ-catenin蛋白表达的变化;甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测细胞处理前后γ-catenin基因的甲基化状态.结果:形态学观察显示,用药后癌细胞体积缩小,核固缩,染色质凝聚成块;5-Aza-CdR明显抑制肾癌细胞OS-RC-2的生长;细胞凋亡率增高;药物处理后γ-catenin蛋白表达恢复;未经5-Aza-CdR处理的OS-RC-2细胞中γ-catenin基因肩动子区域高甲基化,经10-5 mol/L 5-Aza-CdR处理72 h后γ-catenin基因启动子区域高甲基化得到逆转.结论:5-Aza-CdR能有效逆转肾癌OS-RC-2细胞γ-catenin基因的异常甲基化,恢复γ-catenin蛋白表达,诱导肾癌细胞凋亡.
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| 关 键 词： | 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 人肾癌OS-RC-2细胞株 γ-cateniu基因 细胞凋亡 甲基化 |
| 收稿时间： | 2009-01-15 |
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