| 日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因的克隆、表达及虫期表达差异分析 |
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| 作者姓名： | Kong J Feng Z Xu B Deng WP Yang Z Hu W |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物工程学院;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30400562); 国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(No.2003CB716804); 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(No.2007AA02Z153)~~ |
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| 摘 要： | 目的克隆和表达日本血吸虫腺嘌呤磷酸核糖转移酶基因1(SjAPRT1),并研究该基因在日本血吸虫不同发育阶段的转录和蛋白表达情况。方法根据SjAPRT1基因序列(GenBank登录号为AAW24796)设计引物,RT-PCR扩增目的基因,分析其在日本血吸虫各发育阶段转录本差异。将目的基因亚克隆至载体pET28a(+),转化至大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,组氨酸亲和层析法纯化表达产物,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析纯化结果。纯化的蛋白SjAPRT1免疫新西兰白兔制备免疫兔血清,蛋白质印迹(West-ern blotting)分析其免疫反应性及其在日本血吸虫不同发育阶段表达的差异。结果在虫卵、尾蚴、童虫和成虫期均检测到SjAPRT1转录本(561 bp),获得了重组SjAPRT1蛋白。Western blotting分析表明,纯化的重组蛋白SjAPRT1可被日本血吸虫感染兔血清识别,虫卵、童虫和成虫粗抗原可被SjAPRT1免疫兔血清识别,在Mr 25 000处有特异性条带。结论日本血吸虫SjAPRT1蛋白在虫卵、童虫和成虫各期均有表达...
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 腺嘌呤磷酸核糖转移酶 免疫反应性 |
Cloning and expression of adenine phosphoribosyltransferase (APRT) and its differential expression analysis during the developmental stages of Schistosoma japonicum |
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| Kong J,Feng Z,Xu B,Deng WP,Yang Z,Hu W.Cloning and expression of adenine phosphoribosyltransferase (APRT) and its differential expression analysis during the developmental stages of Schistosoma japonicum[J].Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases,2011,29(3):179-182. |
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| Authors: | Kong Juan Feng Zheng Xu Bin Deng Wang-Ping Yang Zhong Hu Wei |
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| Institution: | KONG Juan 1,FENG Zheng 2,XU Bin 2,DENG Wang-ping 2,YANG Zhong 1,HU Wei 2 *(1 Biotechnology School,East China University of Science and Technology,Shanghai 200237,China,2 National Institute of Parasitic Diseases,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Key Laboratory of Parasite and Vector Biology,MOH,WHO Collaborating Centre for Malaria,Schistosomiasis and Filariasis,Shanghai 200025,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Schistosoma japonicum Adenine phosphoribosyltransferase Immune activity |
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