摘 要: | 目的 制备特异性识别人IL-17C的单克隆抗体并进行功能鉴定。 方法 使用6周龄雌性BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备抗人IL-17C单克隆抗体。对所制备的单克隆抗体进行抗体效价检测、交叉反应性测定、特异性鉴定以及亚型鉴定。利用免疫荧光和免疫组化对所制备的IL-17C单克隆抗体进行初步功能鉴定。结果 成功筛选出9株能稳定分泌抗人IL-17C单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F11、3A3、7F10、9B3、10C6、10A7、10B10、12F1和12F7,该9株杂交瘤克隆均具有受体阻断活性。其中,抗人IL-17C单抗7F10和10A7可与小鼠IL-17C发生交叉反应;可选择性结合人IL-17C,而与IL-17家族其他成员均无交叉反应,且均属于IgG1亚类抗体,轻链为κ链。以抗人IL-17C单抗7F10为代表进行了功能实验,结果显示,其作为一抗可成功应用于免疫荧光和免疫组化实验。结论 成功制备了抗人IL-17C单克隆抗体,且7F10成功应用于免疫荧光和免疫组化检测,为IL-17C单抗在相关疾病的诊断和治疗方面奠定了基础。
|