| 细胞核抗原Sm B'的基因克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 杨湘越 兰小鹏 廖剑 钟智强 朱忠勇. 细胞核抗原Sm B'的基因克隆和原核表达[J]. 临床检验杂志, 2006, 24(3): 166-168 |
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| 作者姓名： | 杨湘越 兰小鹏 廖剑 钟智强 朱忠勇 |
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| 作者单位： | 南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福州,350025;南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福州,350025;南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福州,350025;南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福州,350025;南京军区福州总医院,全军医学检验中心,福州,350025 |
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| 基金项目： | 福建省青年人才科技创新基金资助项目（2002J060）. |
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| 摘 要： | ![]()
目的 为建立抗Sm自身抗体检测方法，自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B’。方法 应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术，从HL-60细胞株中克隆Sm B’全长基因，将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序，再定向克隆至pGEX-5T载体中，转入大肠杆菌BL-21，阳性克隆鉴定后在异丙基-β—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下表达，产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹法（western blot）鉴定。结果PCR产物约为700 bp，与预期657 bp接近，测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-ST-Sm B’重组阳性克隆酶切鉴定正确，SDS—PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000，具有与抗Sm B’抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B’，为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。
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| 关 键 词： | 核抗原 克隆 分子 融合基因 |
| 文章编号： | 1000-764X（2006）03-0166-03 |
| 收稿时间： | 2005-07-18 |
| 修稿时间： | 2006-01-19 |
Gene cloning and fusion expression of nuclear antigen Sm B' in E. Coli |
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| YANG Xiangyue,LAN Xiaopeng,LIAO Jian,ZHONG Zhiqiang,ZHU Zhongyong. Gene cloning and fusion expression of nuclear antigen Sm B' in E. Coli[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2006, 24(3): 166-168 |
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| Authors: | YANG Xiangyue LAN Xiaopeng LIAO Jian ZHONG Zhiqiang ZHU Zhongyong |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | nuclear antigen cloning molecular gene fusion |
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