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| EV71结构蛋白VP1的原核表达及VP1单克隆抗体的制备 | |
| 引用本文： | 李晨阳,王弋,古艳丽,古亚楠,陈海燕,田璐,陈丽云,彭涛. EV71结构蛋白VP1的原核表达及VP1单克隆抗体的制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(9): 956-959 |
| 作者姓名： | 李晨阳 王弋 古艳丽 古亚楠 陈海燕 田璐 陈丽云 彭涛 |
| 作者单位： | 1. 广州锐达生物科技有限公司,广东广州,510663 2. 广东华南联合疫苗开发院 3. 呼吸疾病国家重点实验室,中科院广州生物医药与健康研究院,广东广州510000 4. 广东华南联合疫苗开发院;呼吸疾病国家重点实验室,中科院广州生物医药与健康研究院,广东广州510000 |
| 基金项目： | 广州经济技术开发区立项项目，广东省科技项目 |
| 摘 要： | 目的:原核表达EV71结构蛋白VP1并制备其单克隆抗体。方法:以肠道病毒71型(EV71)P1基因为模板,设计引物扩增出目的片段VP1,将其连接至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)上,转化大肠杆菌TG1,筛选出阳性克隆后进行测序。将重组表达载体pET-32a(+)-VP1转化大肠杆菌表达菌株BLgold(DE3),对该工程菌进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,表达产物以包涵体的形式存在。包涵体用6 mol/L盐酸胍溶解,经过Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白。用纯化的VP1蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体(mAb)。结果:获得了24株mAb,其中1株EV71 Westernblot法鉴定呈阳性,5株EV71间接免疫荧光法(IFA)鉴定阳性。结论:成功地制备了VP1的mAb。 |
| 关 键 词： | 肠道病毒71型 VP1 单克隆抗体 |
Expression of structural protein VP1 of enterovirus 71 in E.coli and preparation of anti-VP1 monoclonal antibodies |
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| LI Chen-yang , WANG Yi , GU Yan-li , GU Ya-nan , CHEN Hai-yan , TIAN Lu , CHEN Li-yun , PENG Tao. Expression of structural protein VP1 of enterovirus 71 in E.coli and preparation of anti-VP1 monoclonal antibodies[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2012, 28(9): 956-959 | |
| Authors: | LI Chen-yang WANG Yi GU Yan-li GU Ya-nan CHEN Hai-yan TIAN Lu CHEN Li-yun PENG Tao |
| Affiliation: | 2,3 1Guangzhou Ridabiotech Co.,LTD,Guangzhou 510663;2Southern China United Vaccine Institute;3State Key Laboratory of Respiratory diseases,Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health,Chinese Academy of Sciences,Guangzhou 510000,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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