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老年性白内障与正常晶体上皮细胞中差异表达基因的筛选
引用本文:刘燕,刘新平,药立波,周健,王吉村,柴玉波,胡丹,苏景宽,惠延年. 老年性白内障与正常晶体上皮细胞中差异表达基因的筛选[J]. 医学争鸣, 2003, 24(12): 1066-1069
作者姓名:刘燕  刘新平  药立波  周健  王吉村  柴玉波  胡丹  苏景宽  惠延年
作者单位:1. 第四军医大学西京医院眼科,陕西,西安,710038
2. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033
3. 唐都医院医教部,陕西,西安,710038
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (30 0 0 0 1 85)
摘    要:
目的:筛选老年性白内障与正常晶体上皮细胞的差异表达基因.方法:利用改良消减杂交法获得差异cDNA,利用PCR法扩增其中大片段差异cDNA,将其克隆入质粒载体,通过反向点杂交排除假阳性克隆后,阳性克隆测序与GenBank中的序列进行比较,新序列进行计算机分析。结果:在库中随机挑选约600个克隆酶切鉴定,获得≥750bp片段400个。经反向点杂交,排除假阳性克隆后,共得到阳性克隆150个;测序的50个片段中,有30个已知基因(包括20个功能已知基因、10个序列已知但功能未知基因),3个新序列.新序列中有一个的氨基酸序列与假想的锌指蛋白有45%同源性,可能参与细胞生长调控与代谢.结论:改良消减杂交法可以快速有效地获得老年性白内障差异表达基因,对稀有基因及新基因的发现与功能鉴定有重要意义。

关 键 词:消减杂交法 园翳内障 晶体/细胞学 上皮细胞 差异表达基因
文章编号:1000-2790(2003)12-1066-04
修稿时间:2002-12-30

Screening of differentially expressed genes in epithelial cells of age-related cataract and normal lens
Abstract:
Keywords:subtractive hybridization  lens opacity inter oculopathy  lens   crystalline/cytology  epithelial cells  differentially expressed gene
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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