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IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究
引用本文:朱娜,李昌,郭焱,李沂,孙丹丹,任静强,杜寿文,秦艳青,王茂鹏,田宇飞,金宁一.IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究[J].中国免疫学杂志,2012,28(11):963-967.
作者姓名:朱娜  李昌  郭焱  李沂  孙丹丹  任静强  杜寿文  秦艳青  王茂鹏  田宇飞  金宁一
作者单位:朱娜 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 李昌 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 郭焱 (长春中医药大学,长春,130117) ; 李沂 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 孙丹丹 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 任静强 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 杜寿文 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 秦艳青 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 王茂鹏 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 田宇飞 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ; 金宁一 (军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122) ;
基金项目:国家自然科学基金,973计划,吉林省自然科学基金
摘    要:目的:干扰素rhIFN-α2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位。方法:利用干扰素rhIFN-α2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3全长cDNA,扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序正确后,将IFITM3基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中获得重组质粒pV-IFITM3,通过转染293T细胞进行表达与定位研究。结果:RT-PCR和Western blot结果表明,获得的目的基因IFITM3能够表达,且具有良好抗原活性;激光共聚焦显微镜观察显示,IFITM3基因表达后主要分布于细胞膜上。结论:成功获得IFITM3基因,并验证了其表达。该研究为基于IFITM3的抗病毒药物以及探讨其抗病毒机制研究奠定了坚实基础。

关 键 词:IFITM3  克隆  表达  定位

Cloning of IFITM3 gene and its expression,location in 293T eukaryotic cells
ZHU Na,LI Chang,GUO Yan,LI Yi,SUN Dan-Dan,REN Jing-Qiang,DU Shou-Wen,QIN Yan-Qing,WANG Mao-Peng,TIAN Yu-Fei,JIN Ning-Yi.Cloning of IFITM3 gene and its expression,location in 293T eukaryotic cells[J].Chinese Journal of Immunology,2012,28(11):963-967.
Authors:ZHU Na  LI Chang  GUO Yan  LI Yi  SUN Dan-Dan  REN Jing-Qiang  DU Shou-Wen  QIN Yan-Qing  WANG Mao-Peng  TIAN Yu-Fei  JIN Ning-Yi
Institution:.Genetic Engineering Laboratory of PLA,Academy of Military Medical Sciences of PLA,Changchun 130122,China
Abstract:
Keywords:
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