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慢病毒载体携带siRNAs对乙型肝炎病毒抑制作用的体内研究
引用本文:席力森,邓 蕾,张 勇,高 云,王学浩,孙倍成.慢病毒载体携带siRNAs对乙型肝炎病毒抑制作用的体内研究[J].南京医科大学学报,2009,29(3):317-322.
作者姓名:席力森  邓 蕾  张 勇  高 云  王学浩  孙倍成
作者单位:南京医科大学第一附属医院肝脏外科,江苏,南京,210029  
基金项目:江苏省六大人才高峰课题,江苏省医学重点人才项目 
摘    要:目的:建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染动物模型,在此基础上观察慢病毒载体携带小干扰RNA (small interferingRNAs,siRNAs)对乙型肝炎病毒(HBV)复制和表达的影响.方法:36只Balb/c小鼠随机等分为3组(n=12):①空白对照组(NC组):通过尾静脉注射pTHBV2(包含HBV全基因组真核表达质粒).建立小鼠急性HBV感染模型;②干扰组(E组):将pTHBV2与pWPT-HBV-siRNA1(携带靶向HBV S区的siRNA1的慢病毒)通过尾静脉共注射小鼠;③无关干扰组(I组):pTHBV2和pWPT-HBV-siRNA2(携带非靶向HBV的无关siRNA2的慢病毒)通过尾静脉共注射小鼠.于注射后第4大和第7天取小鼠血清和肝脏组织.采用ELISA法检测血清中HBsAg(HBV表面抗原);选择逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测肝组织HBVS-mRNA水平;用免疫组织化学法检测肝组织HBcAg(HBV核心抗原)和HBsAg.结果:与NC组比较,E组小鼠血清中HBsAg水平在第4和第7天分别下降89.76%和94.81%(P<0.01);RT-PCR结果提示E组肝组织HBV S-mRNA水平明显降低(P<0.05);免疫组织化学法检测结果显示示E组肝组织HBcAg、HBsAg阳性细胞数明显减少(P<0.05).I组与NC组比较,上述检测指标无统计学差异(P>0.05).结论:慢病毒载体携带siRNAs能够显著抑制小鼠体内HBV的复制和表达,并儿抑制作用在第7天较第4天更强.没有减弱的趋势.

关 键 词:小干扰RNA  慢病毒载体  肝炎病毒  乙型
收稿时间:2008/9/13 0:00:00

Studies on inhibition of lentiviral vector carried siRNAs interfering against hepatitis B virus In vivo
XI Li-sen,DENG Lei,ZHANG Yong,GAO Yun,WANG Xue-hao and SUN Bei-cheng.Studies on inhibition of lentiviral vector carried siRNAs interfering against hepatitis B virus In vivo[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2009,29(3):317-322.
Authors:XI Li-sen  DENG Lei  ZHANG Yong  GAO Yun  WANG Xue-hao and SUN Bei-cheng
Institution:Department of Liver Transplantation Center;the First Affiliated Hospital of NJMU;Nanjing 210029;China
Abstract:
Keywords:siRNAs  lentiviral vectors  hepatitis B virus  
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