| 人表皮生长因子慢病毒载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 张丽梅,冯龙,张艳敏,马晶,赵国强,安玉会,鲍玉洲. 人表皮生长因子慢病毒载体的构建及表达[J]. 郑州大学学报(医学版), 2010, 45(4) |
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| 作者姓名： | 张丽梅 冯龙 张艳敏 马晶 赵国强 安玉会 鲍玉洲 |
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| 作者单位： | 河南省眼科研究所分子生物室,郑州450003;郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,郑州450001;郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州,450001;河南省眼科研究所分子生物室,郑州,450003;郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,郑州,450001 |
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| 摘 要： | 目的:构建人表皮生长因子(hEGF)慢病毒(LV)载体.方法:酶切并收集pcDNA 3.1-hEGF载体中的hEGF目的基因片段,克隆进入含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体内,将所得重组体LV-GFP-hEGF与辅助载体pA8.2和pVSVG共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装.收集上清液,按按10-1～10-7倍比稀释后培养,检测病毒滴度;裂解细胞,进行Western Blot分析.结果:PCR扩增、HindⅢ酶切鉴定及测序结果均证实LV-GFP-hEGF构建成功.将LV-GFP-hEGF转染293T细胞,紫外光下检测可见绿色荧光;LV滴度达5×108TU/mL,转染效率＞75%,Western Blot证实转染细胞町表达hEGF.结论:成功构建了含有GFP报告基因的hEGF慢病毒载体,包装后的慢病毒可在293T细胞内高效表达.
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| 关 键 词： | 人表皮生长因子 慢病毒载体 基因构建 |
Construction and expression of lentivirus vector for human epidermal growth factor |
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| ZHANG Limei , FENG Long , ZHANG Yanmin , MA Jing , ZHAO Guoqiang , AN Yuhui , BAO Yuzhou. Construction and expression of lentivirus vector for human epidermal growth factor[J]. Journal of Zhengzhou University: Med Sci, 2010, 45(4) |
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| Authors: | ZHANG Limei FENG Long ZHANG Yanmin MA Jing ZHAO Guoqiang AN Yuhui BAO Yuzhou |
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