| 斑马鱼ISL1蛋白多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 任恋,唐超,刘宪楚,李容,戴悦,彭佩莹,莫小阳.斑马鱼ISL1蛋白多克隆抗体的制备[J].南华大学学报(医学版),2013,41(2):135-139. |
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| 作者姓名： | 任恋 唐超 刘宪楚 李容 戴悦 彭佩莹 莫小阳 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室 心脏发育研究中心，湖南 长沙 410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31172044）,湖南省杰出青年科学基金(10JJ1006),湖南省教育厅优秀青年科技计划项目(11B079) |
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| 摘 要： | 目的为了进一步研究ISL1作为第二生心区心脏前体细胞的分子标志在心脏发育中的功能，需要获得ISL1蛋白并制备其抗体。方法 根据已报道的ISL1基因序列，以斑马鱼mRNA为模板进行PCR扩增得到ISL1部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体。将重组质粒进行酶切测序鉴定，然后利用大肠杆菌E．coli BL21对该重组质粒进行表达。经过IPTG诱导，采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化，将纯化的his-ISL1融合蛋白免疫新西兰大白兔制备ISL1多克隆抗体，并用Western Blot检测抗体效价。结果获得了ISL1原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗ISL1多克隆抗体。结论本实验为ISL1在斑马鱼心脏发育中的新功能的进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | ISL1 斑马鱼 融合蛋白 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2012/12/26 0:00:00 |
The Expression,Purification of ISL1 Zerbrafish Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
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| REN Lian,TANG Chao,LIU Xianchu,et al.The Expression,Purification of ISL1 Zerbrafish Protein and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J].Journal of Nanhua University(Medical Edition),2013,41(2):135-139. |
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| Authors: | REN Lian TANG Chao LIU Xianchu |
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| Institution: | The Center for Heart Development,Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry,Hunan Normal University,Changsha,Hunan 410081,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISL1 Zerbrafish fusion protein polyclonal antibody |
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