内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时HO-1对高尔基体应激的影响

目的探讨内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞损伤时血红素加氧酶1（HO-1）对高尔基体应激的影响。方法体外培养大鼠肺泡巨噬细胞,采用脂多糖（LPS）诱导大鼠肺泡巨噬细胞建立细胞损伤模型。使用CCK-8法检测细胞活力;使用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧簇（ROS）的生成;使用生物化学方法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平;使用TUNEL染色和凋亡相关蛋白caspase-3/7活性检测试剂盒检测细胞凋亡;使用RT-qPCR和Westernblot法检测HO-1和高尔基体磷蛋白3（GOLPH3）的表达;使用Westernblot法检测高尔基体结构相关蛋白GM130、golgin-97和mannosidaseII的表达。使用小干扰RNA（siRNA）沉默HO-1后,重复以上检测。结果LPS刺激肺泡巨噬细胞下调细胞活力、SOD活性及GM130、golgin-97和mannosidaseII表达水平,上调ROS和MDA含量及HO-1和GOLPH3表达水平,并导致TUNEL标记阳性细胞数增多,caspase-3/7活性增强（P<0.05）;HO-1基因沉默后,细胞活力、SOD活性及GM130、golgin-97和mannosidaseII表达显著下降,ROS和MDA含量及GOLPH3表达显著上升,TUNEL标记阳性细胞数增多,caspase-3/-7活性显著增强（P<0.05）。结论内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞损伤时,HO-1可减轻氧化应激和高尔基体应激反应,减少细胞凋亡。