鬼箭羽醇提取物通过阻止氧化应激和抑制TNF-α-NF-κB及TβR1-Smad2/3通路减轻兔肾缺血再灌注损伤

目的探讨鬼箭羽乙醇提取物（EEEA）对家兔肾缺血再灌注损伤（RIRI）的作用及其机制。方法将30只家兔随机分成正常组、模型组、低剂量EEEA（EEEA-L）组、高剂量EEEA（EEEA-H）组、地塞米松（Dex）组和联合治疗（Dex+EEEA-H）组,每组5只。各组动物分别灌胃药物24h后,RIRI造模,再继续用相应药物灌胃13d。其中,正常和模型组家兔灌胃等体积纯水,EEEA-L和EEEA-H组家兔分别灌胃0.156和0.623g/kgEEEA,Dex组灌胃0.2mg/kgDex,Dex+EEEA-H组灌胃0.2mg/kgDex+0.623g/kgEEEA,每天1次。分别于第0、7和14天耳缘静脉采血2mL用于检测电解质、肾功能［血尿素氮（BUN）和血清肌酐（SCr）］、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、白细胞介素2/6（IL-2/6）、转化生长因子β₁（TGF-β₁）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等。第14天采血后,以3%戊巴比妥钠（30mg/kg）耳缘静脉麻醉,取出肾脏,病理学观察及肾组织Paller评分,RT-qPCR和Westernblot检测转化生长因子β受体1（TβR1）、Smad2/3和核因子κB（NF-κB）P65的mRNA和蛋白表达。结果EEEA各组血清K⁺、Cl^-、BUN、SCr、IL-2/6、TGF-β₁、TNF-α和MDA水平及肾组织Paller评分均显著低于模型组,而SOD活性高于模型组（P<0.05）,且这种作用高剂量显著强于低剂量（P<0.05）;病理学也证实EEEA各组较模型组明显好转,较Dex+EEEA-H组肾小管扩张明显;EEEA各组的SOD和MDA水平与Dex+EEEA-H无显著差异（P>0.05）;EEEA各组和Dex+EEEA-H组TβR1和NF-κBP65的mRNA和蛋白表达显著低于模型组（P<0.05）,EEEA-H组与Dex+EEEA-H组无显著差异（P>0.05）。结论EEEA对RIRI家兔的肾功能有保护作用,其机制可能与其多成分多靶位互补作用,阻止了氧化应激反应并抑制了TNF-α-NF-κB和TβR1-Smad2/3信号通路有关。