HPLC法测定云南红豆杉细胞悬浮培养中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ

目的 测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatin Ⅲ,10-DAB Ⅲ)的量.方法 采用不同质量浓度的OGA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP-HPLC法测定细胞和培养液中的10-DAB Ⅲ的量,甲醇-乙腈-水(2∶3∶8)为流动相,检测波长为232 nm.结果 10-DAB Ⅲ在0.05～2.06 μg与峰面积线性关系良好,回归方程为y=89.146X 27.067(R2=0.999 6),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%.OGA(40 μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10-DAB Ⅲ的量.结论 10-DAB Ⅲ的RP-HPLC方法 可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10-DAB Ⅲ细胞生产的有效诱导子.