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| 稳定表达MRG15基因的人晶状体上皮细胞株的建立 | |
| 引用本文： | 张自峰,张健,周健,惠延年,惠玲,刘新平,药立波,王雨生,崔志利.稳定表达MRG15基因的人晶状体上皮细胞株的建立[J].国际眼科杂志,2006,6(3):555-557. |
| 作者姓名： | 张自峰 张健 周健 惠延年 惠玲 刘新平 药立波 王雨生 崔志利 |
| 作者单位： | 1. 710032,中国陕西省西安市,第四军医大学西京医院眼科全军眼科研究所 2. 710032,中国陕西省西安市,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 3. 710043,中国陕西省西安市北方医院眼科兵工眼科中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;第四军医大学校科研和教改项目;第四军医大学校科研和教改项目 |
| 摘 要： | 目的:克隆人15号染色体上死亡相关因子(MORF4-re-latedgeneonchromosome15,MRG15)基因的编码区全长,构建真核表达载体,建立稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株,为MRG15在年龄相关性白内障(agerelatedcataract,ARC)发生中相关功能的研究奠定基础。方法:采用RT-PCR由人ARC晶状体前囊膜标本中扩增MRG15的编码区全长,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1( )中,采用脂质体法对培养人晶状体上皮细胞进行稳定转染,挑取单克隆,用Westernblot进行MRG15表达的鉴定。结果:测序证实,由ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15编码区全长序列正确。重组质粒pcDNA3.1( )-MRG15经酶切后释放出与理论长度相符的片段。培养人晶状体上皮细胞稳定转染挑取单克隆后,经Westernblot检测,30个克隆中有19个MRG15的表达量明显增高。结论:克隆了人MRG15的编码区全长,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1( )-MRG15,并建立了稳定表达MRG15的人晶状体上皮细胞株。 |
| 关 键 词： | MRG15基因 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 克隆 |
| 收稿时间： | 2006-03-06 |
| 修稿时间： | 2006-04-09 |
Establishment of human lens epithelial cell strains with stable expression of MRG15 |
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| Zi-Feng Zhang,Jian Zhang,Jian Zhou,Yan-Nian Hui,Ling Hui,Xin-Ping Liu,Li-Bo Yao,Yu-Sheng Wang,Zhi-Li Cui.Establishment of human lens epithelial cell strains with stable expression of MRG15[J].International Journal of Ophthalmology,2006,6(3):555-557. | |
| Authors: | Zi-Feng Zhang Jian Zhang Jian Zhou Yan-Nian Hui Ling Hui Xin-Ping Liu Li-Bo Yao Yu-Sheng Wang Zhi-Li Cui |
| Abstract: | |
| Keywords: | MRG15 age related cataract human lens epithelial clone |
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