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荧光探针法研究阳离子多聚物基因载体Polybrene与DNA的相互作用
引用本文:廖杰,于冰,丛海林,刘虎威,曹维孝. 荧光探针法研究阳离子多聚物基因载体Polybrene与DNA的相互作用[J]. 感染、炎症、修复, 2007, 8(3): 148-151
作者姓名:廖杰  于冰  丛海林  刘虎威  曹维孝
作者单位:1. 解放军总医院医学实验测试中心,北京,100853
2. 北京大学化学与分子工程学院,分析化学研究所,教育部生物有机化学与分子工程重点实验室,北京分子科学国家实验室,北京,100871
摘    要:目的:用荧光探针法研究海美溴铵(PB)和DNA之间的相互作用。方法:将一定量的PB溶液逐渐加入到DNA/溴化乙锭(EB)复合物的水溶液中,在535nm处激发,测定595nm的荧光强度,观察体系荧光强度随PB浓度变化而发生的改变。用同样的方法观察PB对Hoe-DNA和4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)-DNA体系荧光强度的影响,Hoe的激发和发射波长分别设置为350nm和460nm,DAPI为340nm和450nm。通过荧光Scatchard分析法获得PB对DNA的结合常数。结果:随着PB浓度的增加,EB与DNA的结合减弱。通过对PB存在下EB-DNA体系的荧光分析,获得了PB与DNA之间的结合常数为1.8×105/mol。PB的加入大大提高了Hoe-DNA体系的荧光强度,同时Hoe的最大发射波长由最初的490nm蓝移至460nm。Hoe-DNA体系和DAPI-DNA体系的荧光强度均随着聚合物单体的浓度与DNA磷酸基团的浓度比值(N∶P比值)的增加而增加,并且在N∶P比值等于或接近1.0时达到最大。结论:DNA与PB之间复合物的形成减弱了DNA与嵌入剂的结合,但却能增强DNA和沟区结合探针之间的相互作用。提示PB与DNA的结合可能特异性地影响了DNA的二级结构。

关 键 词:海美溴铵  DNA  荧光探针  相互作用  构型

Studies on the interaction between polybrene and DNA with fluorescence probe
Liao Jie,Yu Bing,Cong Hailin,et al.. Studies on the interaction between polybrene and DNA with fluorescence probe[J]. Infection Inflammation Repair, 2007, 8(3): 148-151
Authors:Liao Jie  Yu Bing  Cong Hailin  et al.
Affiliation:Liao Jie,Yu Bing,Cong Hailin,et al. Medical Experiment Analysis Center,The Chinese PLA General Hospital,Beijing 100853,China
Abstract:
Keywords:Polybrene DNA Fluorescence probe Interaction Conformation
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