| vWF促进intein剪接的BDD-FVⅢ的分泌和活性 |
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| 引用本文： | 朱甫祥,杨树德,刘泽隆,缪静,屈慧鸽,迟晓艳.vWF促进intein剪接的BDD-FVⅢ的分泌和活性[J].药学学报,2010(5). |
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| 作者姓名： | 朱甫祥 杨树德 刘泽隆 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 |
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| 作者单位： | 鲁东大学生命科学学院; |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金资助项目(Y2005D14); 烟台市科技计划项目(2008152); 教育部留学回国人员科研启动基金项目(20071108); 鲁东大学学科建设经费资助项目 |
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| 摘 要： | vWF是由巨核细胞和血管内皮细胞合成的糖蛋白,其主要功能之一为凝血VIII因子(FVIII)的载体,防止后者被血浆酶降解。作者最近的工作证明intein可应用于双载体转移B结构域缺失型FVIII(BDD-FVIII)基因,通过翻译后的蛋白质反式剪接形成完整的功能性BDD-FVIII蛋白。为了研究vWF对于intein连接的BDD-FVIII分泌和活性的影响,通过intein融合的BDD-FVIII重、轻链基因和vWF基因共转染培养的293细胞,采用ELISA观察了分泌至培养上清液中的由intein剪接的全长BDD-FVIII抗原量,并用Coatest检测了由其产生的活性。结果显示,vWF基因共转染细胞上清液中,全长BDD-FVIII抗原量为(235±21)ng·mL-1,活性为(1.98±0.2)u·mL-1,明显高于未转染vWF的细胞(110±18)ng·mL-1和(1.10±0.15)u·mL-1],也明显高于单独转染BDD-FVIII基因的对照细胞(131±25)ng·mL-1和(1.22±0.18)u·mL-1],表明vWF基因共转染可显著改善双载体转BDD-FVIII基因后intein剪接的BD...
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| 关 键 词： | von Willebrand因子 凝血VIII因子 共转染 分泌 intein 蛋白质反式剪接作用 |
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