c/000脐带组织间充质干细胞分离及生物学特性

背景：脐带组织依赖于母体免疫系统的保护，且胚胎自身免疫系统相对不发育、MHC表达低下，故来源于脐带的间充质干细胞的生物学特性已成为目前研究热点。目的：拟在体外分离培养人脐带组织间充质干细胞，并观察其多向分化能力。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006-10/2007-05在四川大学组织工程重建实验室完成。材料：脐带来源于胎龄37~40周的健康新生儿，由四川大学华西第二医院产房提供。方法：取脐带沿血管长轴切开，去掉血管，再将脐带重新缝合形成环状，灌入胶原酶悬液，6~8 h后灌洗离心，获取细胞后贴壁法分离培养、扩增，细胞呈集落生长后传代。取传至第5代细胞，分别加入成骨、成脂诱导分化培养基。主要观察指标：脐带间充质干细胞的形态、生长状况、表面抗原分子的表达、多向分化潜能。结果：去除血管后获取脐带组织细胞的方法可获得贴壁生长的细胞，呈短棒状或梭形样细胞，易扩增和形成集落；高表达基质细胞抗原CD29，CD51，CD71，而不表达CD34，CD45及HLA-DR等造血干细胞抗原分子；成骨诱导后茜素红染色胞浆中有大量的钙沉积，碱性磷酸酶钙钴法染色胞质呈灰黑色，阳性细胞率>85%；成脂诱导后油红O染色示胞浆充满油滴空泡。结论：脐带组织存在具有分化能力的间充质干细胞，并可在体外进行培养扩增形成集落细胞传代，传代细胞表达基质细胞表面抗原，能够向成骨细胞、成脂肪细胞方向分化。

Isolation and biological characteristics of umbilical cord mesenchymal stem cells