乳腺癌抗hEGF单链抗体的筛选和活性鉴定

目的:从噬菌体单链抗体库筛选特异性的抗人表皮生长因子(hEGF)抗体并进行活性鉴定。方法:以hEGF为抗原,对所建抗体库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"的亲和筛选。将筛选后的单链抗体(scFv)通过ELISA和基因测序分析等方法进行鉴定;利用MTT法在体外培养的人乳腺癌细胞系MCF-7/Her-2+中检测抗体的生物结合活性。结果:在亲和筛选过程中,乳腺癌噬菌体scFv得到富集,收获率逐轮得到提高,3轮筛选之后,得到了3株高亲和力的抗hEGF抗体;ELISA检测筛选出的3种有较高活性;测序结果与人hEGF抗体基因序列高度一致;该抗体对MCF-7/Her2+乳腺癌细胞系有特异性杀伤作用。结论:成功地筛选到特异性抗hEGF的scFv抗体,为今后的研究和应用提供依据。