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| 用SSH方法构建BTCC患者尿脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库 | |
| 引用本文： | GUO Baihong,车团结,ZHANG Chong,李琳,SHI Baoguang,王建伟,CHEN Yirong. 用SSH方法构建BTCC患者尿脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库[J]. 临床泌尿外科杂志, 2008, 23(3): 222-227 |
| 作者姓名： | GUO Baihong 车团结 ZHANG Chong 李琳 SHI Baoguang 王建伟 CHEN Yirong |
| 作者单位： | 1. 兰州大学生命科学学院细胞生物学研究所 2. 甘肃省人民医院泌尿外科,兰州,730000 |
| 摘 要： | 目的:应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建膀胱移行细胞癌(BTCC)患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因cDNA消减文库。方法:分别从BTCC患者与正常人尿液中提取总mRNA,用SMART技术反转录成cDNA,经过HaeⅢ酶切后将BTCC尿脱落细胞cDNA分为两组并接上接头,再与过量正常膀胱尿脱落细胞cD-NA进行两轮消减杂交及两轮抑制性聚合酶链反应(PCR),使得差异表达的DNA片段得以富集。PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌JM109构建成差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后,随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。结果:PCR鉴定有317个克隆载有主要在200～900bp之间呈随机分布的插入片段,片段插入率达82.6%,证实建库成功。对20个质粒测序结果经同源性比对分析,其中20个片段源于17个已知基因,1个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列,表明它们可能为BTCC差异表达的新基因。结论:该消减杂交文库质量可靠,其成功构建为进一步筛选、克隆BTCC差异表达基因提供了依据。 |
| 关 键 词： | 膀胱移行细胞癌 基因差异表达 cDNA文库 抑制性消减杂交 |
Constructing the SSH cDNA library in urine exfoliated urothelial cells of bladder neoplasms and normal |
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| GUO Baihong,CHE Tuanjie,ZHANG Chong,LI Lin,SHI Baoguang,WANG Jianwei,CHEN Yirong. Constructing the SSH cDNA library in urine exfoliated urothelial cells of bladder neoplasms and normal[J]. Journal of Clinical Urology, 2008, 23(3): 222-227 | |
| Authors: | GUO Baihong CHE Tuanjie ZHANG Chong LI Lin SHI Baoguang WANG Jianwei CHEN Yirong |
| Abstract: | |
| Keywords: | Bladder transitional cell carcinoma Gene differential expression cDNA library Suppression subtractive hybridization |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |