糖尿病大鼠血-脊髓屏障紧密连接蛋白claudin-1、claudin-5、ZO-1表达变化

目的动态观察糖尿病大鼠血-脊髓屏障紧密连接蛋白claudin-1、claudin-5、ZO1表达。方法雄性SD大鼠60只,随机分为糖尿病模型组和正常对照组2组,每组30只,以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,分别于造模后第15天、30天、90天(各时间点均设对照)取脊髓组织(每次各取6只鼠)以Westernblot和实时荧光定量PCR法检测claudin-1、claudin-5、ZO-1蛋白和mRNA表达。结果 (1)claudin 1、claudin-5蛋白相对表达在糖尿病模型组第30天[分别为(0.324±0.01 5)、(0.289±0.032)]、第90天[分别为(0.220±0.029)、(0.242±0.034)]均较对照组[第30天分别为(0.464±0.009)、(0.475±0.035),第90天分别为(0.468±0.031)、(0.489±0.018)]降低(P0.01),且糖尿病模型组第15天、30天、90天三时间点claudin-1、claudin-5蛋白表达逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。各组均未检出ZO-1表达。(2)claudin-1、claudin-5 mRNA相对表达在糖尿病模型组第30天[分别为(2.67±0.71)×10~(-4) 、(2.87±0.74)×10~(-4)]、第90天[分别为(0.081 4±0.034)×10~(-1)、(0.122±0.027)×10~(-1))]均较对照组[第30天分别为(13.13±3.09)×10~(-1)、(14.81±2.24)×10~(-4),第90天分别为(13.21±1.98)×10 、(1 4.50±2.72)×10~(-4)]降低(P0.01),且糖尿病模型组第15天、第30天、第90天三时间点mRNA相对表达水平逐渐降低,三时间点差异有统计学意义(P0.05)。ZO-1 mRNA表达在糖尿病模型组第15天、第30天及第90天[分别为(4.40±1.94)×10~(-1)、(2.33±0.64)×10~(-1)、(2.32±0.45)×10~(-1)]亦均较对照组[分别为(29.89±6.27)×10~(-1)、(30.68±1 7.64)×10~(-1)、(29.27 ±7.55)×10~(-1)]降低(P0.01)。结论糖尿病可能导致血-脊髓屏障紧密连接蛋白claudin-1、claudin-5、ZO-1表达降低,而且随病程延长claudin-l、claudin-5表达呈逐渐降低趋势。

The changes of tight junction-associated proteins claudin-1, claudin-5 and ZO-1 in diabetic rats