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微小核糖核酸-1256抑制后的钙结合蛋白39上调激活腺苷酸活化蛋白激酶信号传导保护人成骨细胞免受地塞米松诱导的氧化损伤
作者姓名:陈维杨  郝跃东  王守国  季峰
作者单位:南京医科大学附属淮安第一医院骨科
基金项目:国家自然科学基金(81672170);
摘    要:
目的:探索微小核糖核酸-1256(miR-1256)对腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号传导和地塞米松(Dex)诱导的成骨细胞损伤的潜在影响。方法:分别培养hFOB1.19成骨细胞和原代人成骨细胞,地塞米松(1μmol/L,48 h)干预两种细胞,使用miR-1256前体的慢病毒(lv-premiR-1256)、miR-1256反义慢病毒(lv-antagomiR-1256)转染两种细胞。实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-1256和钙结合蛋白39(CAB39)的mRNA表达水平,Western blot法检测miR-1256和CAB39蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞活力,台盼蓝染色法检测细胞死亡及细胞凋亡,RNA下拉检测miR-1256和CAB39的结合,Promega试剂盒检测CAB39的3’非翻译区(3’-UTR)荧光素酶报告基因活性,全自动荧光化学发光分析仪进行活性氧检测。统计学分析采用单因素方差分析。结果:miR-1256主要位于细胞质中,直接与CAB39的mRNA结合。在hFOB1.19细胞和原代人成骨细胞中,异位miR-1256过表达后,CAB39 3’-UT...

关 键 词:地塞米松  成骨细胞  钙结合蛋白39  腺苷酸活化蛋白激酶  微小核糖核酸-1256
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