DNAM-1通过IL-2/STAT-5通路调节Ⅰ型调节性T细胞的增殖和功能

目的探讨DNAM-1对Ⅰ型调节性T细胞（Tr1细胞）活化、增殖和功能的影响及相关分子机制。方法利用anti-CD3/CD28激活小鼠T细胞，采用流式细胞术分别检测静息和激活状态下CD4⁺ T细胞和Tr1细胞DNAM-1分子表达变化；分离DNAM-1基因敲除小鼠（KO小鼠）脾脏初始CD4⁺ T细胞并体外诱导Tr1细胞，流式细胞术检测CD25和CD69活化分子表达水平，CFSE标记后检测增殖能力，IL-2刺激前后检测KO小鼠Tr1细胞分泌IL-10和转录激活蛋白（p-STAT5）水平变化。结果流式细胞术结果显示：与静息状态下相比较，激活状态的CD4⁺ T细胞和Tr1细胞表达DNAM-1分子均增高（P＜0.05）；敲除DNAM-1不影响小鼠脾脏Tr1细胞的数量和比例，但KO小鼠Tr1细胞表达细胞激活分子CD25和CD69均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与WT小鼠比较，KO小鼠诱导型Tr1细胞体外增殖能力降低（P＜0.05）；与WT组Tr1细胞比较，KO小鼠Tr1细胞分泌抑制性细胞因子IL-10水平降低（P＜0.05），给予IL-2刺激后仍无法逆转，表达Il-10 mRNA和Gzmb mRNA水平降低（P＜0.05）；给予不同剂量IL-2刺激Tr1细胞后，KO小鼠Tr1细胞表达p-STAT5水平相比较WT组均降低（P＜0.05）。结论DNAM-1参与Tr1细胞的活化和增殖，并通过IL-2/STAT5信号通路影响Tr1细胞抑制功能。