多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶基因

目的 建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌（K.pneu）中质粒型ampC基因。方法 收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株K.pneu，用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应（mul—PCR），用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶，结合mul—PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析。同时选择4株菌（3株ampC基因阳性，1株阴性）进行转质粒试验，以证实质粒型基因的存在。结果 在mul—PCR试验中，有22株扩增出C4族中长度405bp的片段，1株扩增出C-1族中长度462bp的片段；1株未扩增出目的条带。三维酶抑制试验中，24株菌中有19株菌未检出AmpC酶，但药物敏感试验中有诱导耐药现象，符合C4（DHA）族基因诱导表达的特性。转质粒试验中，3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌。结论 采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法。在我院临床分离的K.pneu中，出现质粒编码的AmpC酶，以C-4族基因为主要流行型。