大麻二酚对应激性心肌损伤的预防及其机制

目的：探索应激性心肌损伤之后，大鼠心肌组织及心肌细胞的状态和可能的作用机制。方法：采用水浸束缚应激的方式，建立大鼠应激性心肌损伤模型，观测大麻二酚治疗之后应激大鼠心率和血压的变化，血清中CORT、BNP、c-TnI、TNF-α和Il-1β的含量变化，以及应激前后心肌组织中mRNA的差异表达，将差异表达最显著的前100位基因按照具有氧化作用和抗氧化作用进行分类，采用HE染色和免疫组化研究方法，观察大麻二酚对应激性心肌损伤的影响，并利用Western blot研究应激性心肌损伤后心肌细胞中蛋白质差异表达。结果：通过HE染色、免疫组化和生化酶学检测验证大鼠应激性心肌损伤模型，心肌损伤的大鼠心率和血压明显升高（P<0.05），血清中CORT （P<0.05）、BNP （P<0.05）、c-TnI （P<0.05）、TNF-α（P<0.05）和Il-1β（P<0.01）也显著升高，使用大麻二酚预处理之后，大鼠的心率（P<0.05）和血压（P<0.01）明显下降，血清中CORT （P<0.001）、c-TnI （P<0.001）、TNF-α（P<0.01）和Il-1β（P<0.05）也显著降低，转录组显示差异表达最显著的前100位基因中，44个基因发挥氧化作用，34个基因具有抗氧化作用。体外研究发现，心肌细胞应激之后细胞中MDA含量明显升高（P<0.01），SOD （P<0.01）和GSH （P<0.01）显著降低，经过剂量为2.5 μmol·L^-1的大麻二酚预处理之后，MDA含量明显降低（P<0.01），SOD （P<0.05）和GSH （P<0.01）水平却明显升高，利用Hoechst 33342和Annexinv-FITC/PI进行双染凋亡细胞检测，发现应激之后心肌细胞凋亡数量显著增加，大麻二酚预处理可减少心肌细胞凋亡，应用Western blot检测发现，应激之后Gsk3β和Bax蛋白表达量显著升高，而Nrf2和Bcl2蛋白表达量则显著降低，经过大麻二酚预处理之后Gsk3β、Bax蛋白表达量显著降低，Nrf2和Bcl2蛋白表达量显著升高。结论：大麻二酚可预防大鼠应激性心肌损伤，并且其作用机制与减少Gsk3β、Bax的表达和升高Nrf2、Bcl2蛋白的表达水平有关。

Prevention of stress-induced myocardial injury by cannabidiol and its potential mechanism