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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平
引用本文:钱(王争),陈波,陈孙孝,周晔,王燕,谷明莉,吴传勇,蒋廷旺,陈燕,邓安梅,仲人前. 定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平[J]. 中国实验诊断学, 2006, 10(11): 1241-1244
作者姓名:钱(王争)  陈波  陈孙孝  周晔  王燕  谷明莉  吴传勇  蒋廷旺  陈燕  邓安梅  仲人前
作者单位:第二军医大学附属长征医院,实验诊断科、全军临床免疫中心,上海200003
基金项目:国家自然科学基金;上海市科技攻关项目;上海市科研项目;上海市青年科技启明星计划;上海市重点基础研究项目
摘    要:目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量。结果PBC患者GNLY mRNA的表达范围为5.35×107-4.61×109拷贝/μg RNA;健康对照者为9.28×105-7.32×107拷贝/μg RNA。PBC组GNLY mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组(P<0.01)和疾病对照乙型肝炎肝硬化组(P<0.001)。结论成功建立了人GNLY基因表达含量的荧光定量检测方法,PBC患者GNLY mRNA的含量显著高于健康对照组,GNLY表达与PBC的发生发展存在一定的关联性。

关 键 词:逆转录-聚合酶链反应
文章编号:1007-4287(2006)11-1241-04
收稿时间:2006-06-27
修稿时间:2006-06-27

Measurement of granulysin gene expression levels on peripheral blood of the patients with primary biliary cirrhosis by real-time quantitative RT-PCR
QIAN Cheng,CHEN Bo,CHEN Sun-xiao,et al.. Measurement of granulysin gene expression levels on peripheral blood of the patients with primary biliary cirrhosis by real-time quantitative RT-PCR[J]. Chinese Journal of Laboratory Diagnosis, 2006, 10(11): 1241-1244
Authors:QIAN Cheng  CHEN Bo  CHEN Sun-xiao  et al.
Abstract:
Keywords:PBC  GNLY
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