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| 小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的克隆与表达 | |
| 引用本文： | 黄红艳,柳天平,孙强,张蓉,陈萍,周鹏,王冀姝,李荣,韩骅. 小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的克隆与表达[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志, 2002, 12(3): 145-148 |
| 作者姓名： | 黄红艳 柳天平 孙强 张蓉 陈萍 周鹏 王冀姝 李荣 韩骅 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学生理学教研室,陕西,西安710032 2. 石家庄国际和平医院检验科,河北,石家庄,510000 3. 第四军医大学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安710032 4. 第四军医大学口腔医学院,陕西,西安710032 |
| 摘 要： | 目的 :克隆小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因 ,并进行原核表达及蛋白纯化 ,为制备mNotch1的单克隆抗体做准备。方法 :计算机分析小鼠Notch1全长 ,PCR扩增其胞外段高抗原区编码基因 ,克隆入载体T -vector进行序列测定 ,然后将测定正确的片段连入GST融合表达载体pGEX - 4T - 1,得到pG -NEF ,转化宿主菌DH5α ,经IPTG诱导 ,SDS -PAGE分析 ,以及新生条带表达形式分析以后 ,用GST亲和层析柱纯化。结果 :小鼠Notch1分子胞外段近膜处约 170个氨基酸区域抗原性较高 ,PCR扩增得到大小约 5 0 0bp的特异性片段 ,序列测定结果与文献报导的完全一致 ;原核表达产物大小约Mr 43× 10 3 ,以包涵体形式存在 ,约占总蛋白的2 5 % ,纯化后目的蛋白含量 >95 %。结论 :成功地进行了小鼠Notch1胞外段高抗原区编码基因的基因克隆、原核表达及蛋白纯化。 |
| 关 键 词： | Notch1 基因克隆 原核表达 蛋白纯化 |
| 文章编号： | 1005-2593(2002)03-0145-04 |
| 修稿时间： | 2001-09-21 |
Cloning and expression of gene encoding extra-cellular fragment with strong antigenicity of mouse Notch1 |
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| HUANG Hong-yan ,LIU Tian-ping,SUN Qiang,et al. Cloning and expression of gene encoding extra-cellular fragment with strong antigenicity of mouse Notch1[J]. Chinese Journal of Conservative Dentistry, 2002, 12(3): 145-148 | |
| Authors: | HUANG Hong-yan LIU Tian-ping SUN Qiang et al |
| Affiliation: | HUANG Hong-yan *,LIU Tian-ping,SUN Qiang,et al |
| Abstract: | |
| Keywords: | notch1 clone gene targeted protein expressing protein purification |
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