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大鼠血红素氧化酶 1的基因克隆和原核表达
引用本文:徐波,郑永晨,费邵阳,高航.大鼠血红素氧化酶 1的基因克隆和原核表达[J].吉林大学学报(医学版),2007,33(6):982-985.
作者姓名:徐波  郑永晨  费邵阳  高航
作者单位:(1.吉林大学第二医院中心实验室,吉林 长春 130041;2. 吉林大学第一医院神经外科,吉林 长春 130021 )
摘    要:目的:从大鼠脾中克隆出血红素氧化酶1(RHO-1)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中表达其蛋白。方法:用RT-PCR从大鼠脾总RNA中扩增出RHO-1 cDNA,并将其克隆入pMD18-T载体, 经TA克隆测序分析后,将阳性TA克隆RHO-1片段亚克隆入pET28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL-21,经限制性内切酶图谱鉴定后,阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析。结果:TA克隆测序分析证实该基因全长870 bp,编码289个氨基酸,所克隆的基因序列与GenBank中登录的RHO-1基因序列完全一致;限制性内切酶图谱结果表明成功构建了RHO-1的原核表达载体;SDS-PAGE结果显示RHO-1基因在大肠杆菌中获得表达。结论:用RT-PCR正确克隆RHO-1基因,构建pET28a(+)/RHO-1表达载体,并成功表达RHO-1融合蛋白。

关 键 词:克隆分子    原核表达    
文章编号:1671-587X(2007)06-0982-04
收稿时间:2006-11-24
修稿时间:2006年11月24

Cloning and expression of rat heme oxygenase 1 in E. coli
XU Bo,ZHENG Yong-chen,FEI Shao-yang,GAO Hang.Cloning and expression of rat heme oxygenase 1 in E. coli[J].Journal of Jilin University: Med Ed,2007,33(6):982-985.
Authors:XU Bo  ZHENG Yong-chen  FEI Shao-yang  GAO Hang
Institution:(1.Central Laboratory,Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041,China; 2.Department of Neurology,First Hospital,Jilin University,Changchun 130021,China)
Abstract:
Keywords:heme oxygenase(decyclizing)  cloning  molecular  prokaryotic expression
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