| 人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建 |
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| 引用本文： | 陈紫千,汤耀卿,张奕,张轶,张圣道,刘新垣,邹卫国.人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建[J].上海交通大学学报(医学版),2004,24(9):720-722. |
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| 作者姓名： | 陈紫千 汤耀卿 张奕 张轶 张圣道 刘新垣 邹卫国 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学瑞金医院消化外科，上海第二医科大学瑞金医院消化外科，上海第二医科大学瑞金医院消化外科，上海第二医科大学瑞金医院消化外科，上海第二医科大学瑞金医院消化外科，中国科学院上海生命科学院细胞生化所，中国科学院上海生命科学院细胞生化所 上海 200025，上海 200025，上海 200025，上海 200025，上海 200025 |
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| 基金项目： | 上海市科委基金(00419019)资助项目. |
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| 摘 要： | 目的 构建人IL-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3IL-10的CMV启动子下游完整切下IL-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化IL-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人IL-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人IL-10的表达。结果 成功地构建人IL-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到IL-10的表达。结论 构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。
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| 关 键 词： | IL—10 缺陷型 IL-10 重组腺病毒 体外感染 表达 DNA 阳性克隆 质粒 基因重组 |
| 文章编号： | 0258-5898(2004)09-0720-03 |
| 修稿时间： | 2003年11月5日 |
Construction of replication-deficient human IL-10 recombinant adenovirus |
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| CHEN Zi-qian,TANG Yao-qing,ZHANG Yi,ZHANG Yi,LIU Xin-yuan,ZOU Wei-guo,ZHANG Sheng-dao.Construction of replication-deficient human IL-10 recombinant adenovirus[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2004,24(9):720-722. |
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| Authors: | CHEN Zi-qian TANG Yao-qing ZHANG Yi ZHANG Yi LIU Xin-yuan ZOU Wei-guo ZHANG Sheng-dao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | adenovirus vector interleukin-10 gene expression |
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