大鼠骨髓基质干细胞在成骨诱导剂条件下的成骨能力

目的：观察在有成骨诱导剂存在的条件下，大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞转化的能力。方法：实验于2005-07／12在锦州医学院中心实验室完成。选取清洁级2月龄SD大鼠6只，无菌条件下取双侧股骨，制备单细胞悬液。采用贴壁培养与传代结合方法分离纯化大鼠骨髓基质干细胞，将2代细胞置于含有1&;#215;10^-7mol／L地塞米松、10mol／L β-甘油磷酸钠、50mg／L抗坏血酸成骨诱导剂的培养基中，培养21-30d。应用倒置显微镜观察骨髓基质干细胞与诱导后细胞形态，描绘生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期，并用碱性磷酸酶染色和VON—KOSSA法检测成骨能力。结果：6只大鼠均进入结果分析。①骨髓基质干细胞形态学观察结果：在成骨诱导剂里细胞增殖变缓慢，呈长梭形、成纤维细胞样或不规则形。②细胞生长曲线：1-2d为潜伏期，细胞增殖不明显：3d后细胞增殖明显加快，进入对数生长期；6d后增殖变慢为平台期。经计算细胞群体倍增时间为38h。③细胞增殖周期检测结果：G0／G1期为（82．12&;#177;4．60）％，S期为（14．35&;#177;2．32）％，G2／M期为（0.87&;#177;0.30）％。④成骨能力检测结果：细胞碱性磷酸酶染色阳性率为86％，VON-KOSSA染色提示有钙结节形成。结论：大鼠骨髓基质干细胞在有成骨诱导剂存在的情况下成骨能力较高，

Osteogenic capacity of rat bone marrow stromal stem cells in bone-forming agent